TNT Quick Coupled Transcription/Translation systémy obsahují RNA polymerázu, nukleotidy, soli, aminokyseliny, rekombinantní ribonukleázový inhibitor RNasin a roztok lyzátu retikulocytů a poskytují tak veškeré enzymové vybavení pro pohodlnou in vitro transkripci a translaci eukaryotických proteinů v jediné zkumavce. TNT systém je dostupný ve dvou konfiguracích pro expresi genů klonovaných buďto za T7 nebo SP6 promotorem RNA polymerázy. Pro účinnou expresi proteinu se smíchá TNT master mix s 0,2-2,0 µg cirkulárního plazmidu obsahující T7 nebo SP6 promotor nebo s PCR fragmentem obsahujícím T7 promotor na konečný objem 50 µl. Celá reakce se pak inkubuje 60-90 min při 30 °C a produkuje dostatečné množství proteinu pro různé aplikace včetně GST-pull down nebo gel shift esej. ·
- Spřažená in vitro transkripce/translace pro expresi eukaryotických proteinů
- Funkční protein je exprimován již za 1 hodinu a lze ho přímo použít pro studium proteinových interakcí, interakcí s nukleovými kyselinami aj.
- Výběr z variant s SP6 nebo T7 promotorem
- Exprimovaný protein je funkční a post-translačně modifikovaný
